此外，在分化的第8天，来自ARCs的生长培养基处理的3T3-L1细胞的成脂基因表达比来自APCs的生长培养基处理的细胞低约2倍（Fig 3B）。以上结果表明：ARCs可以抑制邻近前脂肪细胞（adipose precursors）分化为脂肪细胞。研究人员也检测了CD142-high-APCs是否能抑制邻近前脂肪细胞（adipose precursors）的脂肪生成。基因分析结果显示，CD142-high-APCs不高表达抑制成脂基因，如Ddk3、Meox2、Spink1等。用APCs或CD142-high-APCs的生长培养基处理的3T3-L1细胞进行分化时，两种处理组之间的脂质油红染色并无显著差异。并且两种3T3-L1细胞表现出相似的成脂标记物水平（Fig S3B）。综上结果得出结论：在衰老小鼠的SAT中，只有ARC可以抑制邻近细胞的脂肪生成，而CD142-high-APCs则没有抑制。

拓展阅读

紫外辐照实验

据文献报道，紫外线A（UVA）抑制人脂肪组织来源的间充质干细胞（hAMSCs）的成脂分化，UVA降低PPARγ和CEBPα的mRNA水平，UVA还下调了PPARγ靶基因（脂蛋白脂肪酶（LPL），CD36，脂肪细胞蛋白（aP2）和肝X受体α（LXR）的mRNA水平。进一步研究发现，UVA抑制hAMSCs的成脂分化主要是通过降低PPARγ的表达，这是通过激活MIF-AMPK信号通路从而上调KLF2来介导的。本研究利用了紫外辐照处理ARC，从而抑制其成脂分化。

方法步骤：使用流式分选出ARC，预冷的PBS洗涤一遍，将细胞用PBS覆盖。然后使用以365 nm为中心的UV台照射细胞1小时。最后将辐照后的细胞与3T3-L1进行共培养。

如Fig 1C的结果中，ARCs表达大量的细胞因子。一些趋化因子及其受体，如Cxcl3和Cxcr2在之前的研究中已被报道可以促进3T3-L1细胞的脂肪分化。因此，研究人员推测ARC可能通过分泌趋化因子来影响附近的APC分化。qRT-PCR结果显示：与其他高表达趋化因子的细胞亚群（如巨噬细胞）相比，Ccl6是ARC中表达最高的趋化因子（Fig 3C）。因此，作者通过用Ccl6或对照His肽处理3T3-L1细胞，检测Ccl6对分化的影响。油红染色显示，与对照组相比，Ccl6处理后的细胞脂质减少；Ccl6处理组的Pref-1表达水平提高约2倍；成脂标志物基因：C/ebpδ、Pparγ和Fabp4的表达量则显著降低（Fig 3D）。为了进一步确定ARC对邻近细胞成脂的抑制作用是否依赖于Ccl6，研究人员将3T3-L1细胞分别培养在APC生长培养基、ARC生长培养基和加入Ccl6中和性抗体的ARC生长培养基。结果显示，ARC培养基中的3T3-L1细胞的C/ebpδ、Pparγ和Fabp4表达水平显著降低，Pref-1水平显著升高，然而APC培养组和Ccl6中和抗体组都表现出成脂标志物基因表达上升，Pref-1表达下降。

上述结果表明ARC对邻近细胞脂肪分化的抑制作用是由于ARC生长培养基中分泌Ccl6