scRNA-seq分析结果显示，衰老小鼠的APCs、AFFs和SAT前脂肪细胞（preadipocytes）表达的促成脂分化因子水平均低于年轻小鼠（Fig 3E-G）。然后作者利用Pdgfrα和Pref-1分选出APCs，分析这些细胞在不培养情况下的基因表达情况。基因分析结果显示，老年小鼠iWAT中APCs的C/ebpβ和C/ebpδ水平低于年轻小鼠APCs，进一步证实了随着衰老的发展，老年小鼠的APCs相对于年轻小鼠的成脂分化能力下降。这些结果提示了ARCs对老年小鼠SAT中APCs的脂肪形成有抑制作用。然而，老年小鼠APCs中TNF-α、Ctsd（组织蛋白酶D）和Gpnmb（跨膜糖蛋白NMB）等炎症因子表达增加，可能进一步降低成脂分化能力（Fig 3G，右）。研究人员检测了从人类SAT中分离的APCs，在人类样本的Lin-细胞中，如C/EBPδ和PPARγ等成脂基因都随着衰老而减少。这些结果表明，衰老过程中APCs的成脂分化能力下降，可能不仅是由于它们本身导致的，更可能是由于ARC的出现对它们产生的抑制作用（Fig 3H）。
有趣的是，当3T3-L1细胞在来自ARC或前脂肪细胞（preadipocytes）的生长培养基中以低密度培养48小时后，ARC细胞上清处理的细胞增殖比前脂肪细胞（preadipocytes）细胞上清处理的细胞增殖降低了50%（Fig S3C）。同样的，用His-Ccl6重组蛋白处理，低密度培养3T3-L1细胞48小时，其细胞数量比添加His肽的对照组细胞数量低50%（Fig S3D）。这些结果表明，ARCs不仅抑制前脂肪细胞（precursor cells）的成脂分化，而且可能会降低这些细胞的增殖速度。
scRNA-seq鉴定到每一种脂肪细胞亚群，如MSCs、APCs、AFFs、前脂肪细胞（preadipocytes）和早期脂肪细胞，这些细胞数量在衰老小鼠中都显示减少，在老年小鼠中更明显降低（Fig 1A）。此外，衰老小鼠的MSCs中干细胞静止基因（quiescence genes）的表达量增加，而APCs则表现为增殖相关基因的表达水平降低（Fig S3E）。相似的，CD142-high-APCs、AFFs和前脂肪细胞（preadipocytes）表现出增殖相关基因的表达降低，这与衰老小鼠细胞数量的急剧减少有关。
接下来，研究人员在体内验证了前脂肪细胞（adipose precursors）增殖能力的降低。通过给小鼠注射EdU，使用Pref-1和Pdgfrα从Lin-细胞中流式细胞分选出APCs。经EdU染色后的APCs进行FACS分析，结果显示与年轻小鼠相比，老年小鼠的EdU+ APCs百分比显著降低（Fig 3G，左），同时研究人员采用MTT法进一步证实了其增殖能力的降低。流式分选后，从年轻和老年小鼠中分离的相同数量的APCs以低密度接种并培养48h。老年小鼠APCs的细胞数量始终要比年轻小鼠少，这一结果表明APCs不会在衰老过程中增殖。总之，